免疫检查点抑制剂(ICIs)耐药性限制了肝细胞癌(HCC)免疫治疗的成功。然而，免疫治疗耐药的机制仍然难以捉摸。
2024年2月22日，复旦大学李辉、郭磊、叶青海、樊嘉及中国台湾中国医科大学洪明奇（Mien-Chie Hung）等合作在Journal of Hepatology 在线发表题为“CRKL dictates anti-PD-1 resistance by mediating tumor-associated neutrophil infiltration in hepatoce”的研究论文，该研究发现CRKL通过介导肝癌中肿瘤相关的中性粒细胞浸润来调控抗PD-1的耐药性。CRKL是一种候选抗PD-1耐药基因。CRKL过表达通过动员肿瘤相关中性粒细胞(TANs)阻断CD8+ T细胞的浸润和功能而使抗PD-1治疗效果无效。PD-L1+ TANs被发现是TANs的一个重要子集，受CRKL表达调节，并表现出免疫抑制表型。
在机制上，CRKL通过竞争性地降低Axin1结合抑制APC介导的β连环蛋白蛋白酶体降解，从而促进VEGFα和CXCL1的表达。使用人类HCC样本，验证了CRKL/β-catenin/VEGFα与CXCL1的正相关。利用CRISPR-Cas9基因编辑(CRKL敲除)靶向CRKL或其下游调节因子，在原位小鼠模型和患者源性器官型肿瘤球体(PDOTS)模型中有效恢复抗PD-1治疗的疗效。CRKL/β-catenin/VEGFα和CXCL1轴的激活是成功抗PD-1治疗的关键障碍。因此，CRKL抑制剂联合抗PD-1可能用于治疗HCC。
肝细胞癌(HCC)是全球癌症相关死亡的第三大原因。虽然HCC治疗有了很大的进步，但大多数HCC患者不符合手术切除标准。免疫检查点抑制剂(ICIs)在癌症免疫治疗领域取得了不可磨灭的成就;根据III期临床试验IMBrave150的阳性结果，atezolizumab+贝伐单抗已成为晚期HCC患者的一线联合治疗方案。然而，其他针对HCC患者的抗PD-1治疗的随机临床试验并没有显示出显著的改善，从而表明存在形成HCC复杂免疫抑制微环境的机制，以驱动抗PD-1治疗的耐药，突出了迫切需要确定更好的生物标志物，以优化患者选择和克服免疫治疗耐药。
中性粒细胞是人体中最丰富的循环白细胞，在多种癌症类型中积累。肿瘤中的中性粒细胞表现出显著的可塑性，并在T细胞炎症微环境中获得T细胞抑制能力。中性粒细胞可通过释放抗肿瘤因子如TSP-1和H2O2来抑制肿瘤进展，并在免疫治疗中获得抗肿瘤表型，从而发挥抗肿瘤作用。然而，更多的研究表明，肿瘤相关中性粒细胞(TANs)具有促肿瘤作用，包括免疫耐受。在一些实体人肿瘤中，TANs的高水平浸润有助于肿瘤进展、淋巴结转移、血管生成和预后不良，强调了TANs在协调免疫抑制肿瘤微环境(TME)和免疫治疗耐药在预后不良中的关键作用。
机理模式图（图源自Journal of Hepatology ）
人类激酶样基因(CRKL)的CT10调控因子位于染色体22q11.21上。CRKL是一种连接蛋白，由一个Src同源2 (SH2)结构域和两个SH3结构域组成。已经鉴定出几种与SH2和N端SH3结构域结合的蛋白。CRKL普遍表达，并参与多种生物过程，介导细胞增殖、迁移、粘附、细胞骨架变化、分化、吞噬和病原体摄取。CRKL在多种癌症中表达升高，CRKL的扩增驱动癌转化和表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂耐药性。这些发现表明，异常的CRKL表达在肿瘤进展中起着重要作用。
该研究发现CRKL在抗PD-1耐药的HCC组织中表达上调，CRKL过表达通过募集TANs和重塑肿瘤免疫微环境(TIME)促进抗PD-1耐药，提示CRKL是克服抗PD-1耐药的潜在靶点。这些发现支持以贝伐单抗为基础的ICIs联合治疗策略，CRKL抑制剂联合抗PD-1治疗可能被开发用于HCC的治疗。
原文链接：https://doi.org/10.1016/j.jhep.2024.02.009
